TBa過敏原表位區(qū)段的融合表達及免疫活性分析

為了確定苦蕎過敏原TBa(tartary buckwheat allergen)的抗原表位及進一步了解蕎麥過敏反應機制,本實驗以苦蕎過敏原TBa cDNA序列為模板,設(shè)計引物,克隆苦蕎過敏原TBa表位區(qū)段基因,分別構(gòu)建TBa及兩個表位區(qū)段原核表達載體,在大腸桿菌BL21(DE3)中進行表達并純化,采用競爭ELISA對其免疫活性進行分析與比較.SDS-PAGE及Western Blot鑒定和檢測結(jié)果表明,目的蛋白在E.coli BL21(DE3)中可高效表達,其N端帶有6個組氨酸標簽.Ni2+-NTA瓊脂糖柱親和純化得到了純度較高的目的片段.ELISA實驗結(jié)果顯示,表達產(chǎn)物與蕎麥食品過敏病人血清中的IgE具有特異的結(jié)合活性.本研究為揭示苦蕎過敏蛋白結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系奠定了基礎(chǔ).

作 者： 蔡桂紅 李玉英 張政 王轉(zhuǎn)花 CAI Gui-hong LI Yu-ying ZHANG Zheng WANG Zhuan-hua   作者單位： 化學生物學與分子工程教育部重點實驗室,山西大學生物技術(shù)研究所,山西,太原,030006  刊 名： 食品科學  ISTIC PKU 英文刊名： FOOD SCIENCE  年，卷(期)： 2006 27(11)  分類號： Q78 R392  關(guān)鍵詞： 苦蕎麥過敏原   表位   融合表達   免疫活性  

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