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結締組織生長因子小干擾RNA的構建及其干擾效果檢測
目的:構建結締組織生長因子(CTGF)基因的小干擾RNA(siRNA),并檢測其對CTGF基因表達的干擾效果.方法:根據CTGF基因序列,設計2條合理的CTGF-siRNA,并將其克隆到siRNA載體pSliencer 2.1-U6 neo中,轉化大腸桿菌DH5a,挑取陽性菌落進行酶切和測序鑒定;將構建成功的CTGF-siRNA重組質粒與帶FLAG標簽的CTGF表達載體共同轉染人胚腎293T細胞,Western印跡檢測siRNA的干擾效果.結果:構建了2個CTGF-siRNA重組質粒,2條siRNA都有干擾作用,其中一條的干擾效果可達75%以上.結論:構建的CTGF-siRNA可為進一步研究CTGF的功能提供參考.
作 者: 李勤操 鄭喜邦 王曉暉 楊智洪 姜艷超 丁麗華 李杰萍 葉棋濃 LI Qin-Cao ZHENG Xi-Bang WANG Xiao-Hui YANG Zhi-Hon JIANG Yan-Chao DING Li-Hua LI Jie-pin YE Qi-Nong 作者單位: 李勤操,LI Qin-Cao(軍事醫學科學院,生物工程研究所,北京,100850;廣西大學,動物科學技術學院,廣西,南寧,530005)鄭喜邦,ZHENG Xi-Bang(廣西大學,動物科學技術學院,廣西,南寧,530005)
王曉暉,楊智洪,姜艷超,丁麗華,李杰萍,葉棋濃,WANG Xiao-Hui,YANG Zhi-Hon,JIANG Yan-Chao,DING Li-Hua,LI Jie-pin,YE Qi-Nong(軍事醫學科學院,生物工程研究所,北京,100850)
刊 名: 生物技術通訊 ISTIC 英文刊名: LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2008 19(3) 分類號: Q78 關鍵詞: 結締組織生長因子 小干擾RNA 表達載體【結締組織生長因子小干擾RNA的構建及其干擾效果檢測】相關文章:
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