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突變前后天花粉蛋白的生物活性及免疫原性比較研究
目的:對(duì)天花粉蛋白(Trichosanthin,TCS)進(jìn)行定點(diǎn)突變,比較其與野生型TCS(wTCS)間的生物活性及免疫原性差異. 方法:選擇TCS分子上可能的抗原決定簇位點(diǎn)(YFF81-83和KR173-174)進(jìn)行定點(diǎn)突變,并將所構(gòu)建的突變體(TCSYFF-KR)在大腸桿菌中表達(dá)及純化.隨后將其與wTCS比較,分析其DNA酶活性、致核糖體失活活性和免疫原性. 結(jié)果:構(gòu)建的突變體TCSYFF-KR其活性與wTCS活性幾乎相當(dāng),而免疫原性有所降低. 結(jié)論:通過(guò)該方法改造TCS是可行的,所構(gòu)建的突變體TCSYFF-KR值得進(jìn)一步研究.
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