Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細胞定位及熒光共定位研究

目的:觀察腦信號蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細胞定位及兩者的熒光共定位情況,為明確Sema4C和GIPC在亞細胞水平的相互作用提供佐證.方法:將Sema4C的基因編碼區全長、胞外段和胞內段分別構建到pEGFPN1和pEGFPC1表達載體中,將GIPC編碼區基因構建到pDsRed-C1表達載體中,分別轉染HEK293細胞,觀察亞細胞定位;將pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分別共轉染HEK293和COS7細胞,觀察兩者的熒光共定位情況.結果:酶切鑒定及測序結果表明重組載體構建正確,Sema4C蛋白全長和胞外段呈跨膜分布,而胞內段在全細胞中呈彌散樣分布;GIPC在胞漿內呈斑塊狀聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在熒光共定位區域.結論:Sema4C主要在胞膜和胞漿內表達.GIPC主要在胞漿內呈斑塊樣聚集分布;Sema4C和GIPC之間存在熒光共定位.

作 者： 吳燕 吳海濤 劉淑紅 范文紅 范明 WU Yan WU Hai-Tao LIU Shu-Hong FAN Wen-Hong FAN Ming   作者單位： 軍事醫學科學院,基礎醫學研究所,北京,100850  刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號： Q25  關鍵詞： Sema4C   腦信號蛋白   GIPC   HEK293細胞   COS7細胞   激光共聚焦顯微鏡  

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