乳糖誘導大腸桿菌中重組谷氨酰胺合成酶的表達

以重組枯草芽孢桿菌谷氨酰胺合成酶(L-谷氨酸:氨連接酶,Glutamine Synthetase,GS EC 6.3.1.2)蛋白表達宿主菌株BL21(DE3) (pET3C/谷氨酰胺合成酶)作為研究對象,借助SDS-PAGE分析方法,對于用乳糖誘導由T7lac啟動子控制的重組目的產物蛋白的表達規律進行了優化研究,分別比較了最佳誘導起始生長量、所需乳糖的濃度、誘導持續時間、補加乳糖和氨芐青霉素及不同培養基等參數對重組產物表達的影響.實驗結果表明,對于T7lac啟動子控制的重組目的產物,乳糖作為誘導劑也可以起到很好的誘導表達效果,誘導產物的表達量、可溶性及酶活與IPTG誘導產物基本接近.本研究結果為乳糖作為誘導劑應用于重組大腸桿菌谷氨酰胺合成酶工業化生產提供了一定的參考依據.

作 者： 劉俊紅 劉順誼 殷志敏 Liu Junhong Liu Shunyi Yin Zhimin   作者單位： 劉俊紅,Liu Junhong(安徽師范大學生命科學學院,安徽,蕪湖,241000;南京師范大學生命科學學院,江蘇,南京,210097)

劉順誼,殷志敏,Liu Shunyi,Yin Zhimin(南京師范大學生命科學學院,江蘇,南京,210097) 

刊 名： 南京師大學報（自然科學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 29(3)  分類號： Q78  關鍵詞： 谷氨酰胺合成酶   原核表達   乳糖   IPTG  

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