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基因槍法導入cyclAt和GUS基因獲得轉基因水稻
以cyclAt基因為目的基因,HPT和GUS為選擇和報告基因,應用PDS-1 000/He型基因槍協同轉導,通過轟擊來源于水稻成熟種子誘導產生的胚性愈傷組織,獲得了轉基因水稻植株.結果表明:通過X-Gluc染色分析,GUS基因在愈傷組織和再生植株葉片中的表達效率高.以轉基因植株的基因組DNA為模板,用cyclAt基因的特異性引物對其進行PCR擴增,只檢測到1 000bp左右的片段,比其1 604bp的完整序列小,因此推測cyclAt基因在轉導入水稻后被剪接.此外,在協同轉導過程中,cyclAt和GUS可能與受體基因組DNA隨機整合,因此視GUS基因為報告基因有一定局限性;但兩者同時被整合的頻率遠高于單一基因的整合.
作 者: 曠仁平 姜孝成 張春來 Malcom C Elliott 徐孟亮 肖國櫻 KUANG Ren-ping JIANG Xiao-cheng ZHANG Chun-lai Malcom C Elliott XU Meng-liang XIAO Guo-ying 作者單位: 曠仁平,姜孝成,徐孟亮,KUANG Ren-ping,JIANG Xiao-cheng,XU Meng-liang(湖南師范大學生命科學學院,中國,長沙,410081)張春來,Malcom C Elliott,ZHANG Chun-lai,Malcom C Elliott(英國德蒙特福大學健康與生命科學學院諾曼-布拉格研究所,英國萊斯特)
肖國櫻,XIAO Guo-ying(中國科學院亞熱帶農業生態研究所,中國,長沙,410125)
刊 名: 湖南師范大學(自然科學學報) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF NATURAL SCIENCE OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY 年,卷(期): 2006 29(3) 分類號: Q3 關鍵詞: 水稻 基因槍轉化 cyclAt GUS PCR【基因槍法導入cyclAt和GUS基因獲得轉基因水稻】相關文章:
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