大腸桿菌中高效表達rhBMP-4的探討及初步活性測定

目的:在大腸桿菌中表達具有生物活性的rhBMP-BMP-4.方法:在不改變氨基酸序列的前提下,以全基因合成的方式對人BMP-4成熟肽基因全長進行定點突變,將之重組入pET-3c表達載體并轉化至大腸桿菌BL21(DE)plysS.IPTG誘導和包涵體復性后,利用C2C12細胞橫向成骨細胞分化實驗以及小鼠肌袋異位骨形成實驗檢測其活性.結果:獲得0.348kb的BMP-4 DNA序列,表達的目的蛋白主要以包涵體的形式存在.經純化及復性后,體內與體外的活性檢測表明rhBMP-4有良好的誘骨生成活性.結論:該方案能夠實現rhBMP-4在大腸桿菌中的高效表達.

作 者： 高思紅 汪炬 董群偉 劉侃 劉雪婷 洪岸 謝秋玲 孫奮勇 GAO Si-hong WANG Ju DONG Que-wei LIU Kan LIU Xue-ting HONG An XIE Qiu-ling SUN Fen-yong   作者單位： 高思紅,汪炬,劉侃,劉雪婷,洪岸,謝秋玲,孫奮勇,GAO Si-hong,WANG Ju,LIU Kan,LIU Xue-ting,HONG An,XIE Qiu-ling,SUN Fen-yong(暨南大學生物工程研究所,廣州,510632)

董群偉,DONG Que-wei(廣東藥學院附屬第一醫院骨科,廣州,510632) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q81  關鍵詞： rhBMP-4   定點突變   包涵   體活性  

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