葡萄病毒B的RT-PCR檢測技術研究

旨在建立適合葡萄的葡萄病毒B的RT-PCR檢測技術.從感染葡萄病毒B的葡萄皮層中提取總RNA,以其為模板合成cDNA第一鏈,并利用兩對引物分別進行PCR擴增;回收PCR特異擴增產物,與pUCm-T載體連接,并進行轉化、重組克隆的篩選、重組質粒的酶切鑒定和序列測定.結果顯示,兩對引物均能獲得與預期片段大小一致長約460 bp和470 bp的擴增產物擴增片段序列與已報道GVB序列(序列號:X75448)的核苷酸同源性均為81%,經反復多次試驗證實,利用總RNA為模板合成cDNA并進行PCR擴增檢測GVB是準確、可靠的.

作 者： 楊相昆 田海燕 牛建新 王林 代永欣   作者單位： 楊相昆(石河子大學農學院園藝系,石河子,832003;新疆兵團綠洲生態農業重點實驗室,石河子,832003;新疆農墾科學院,石河子,832003)

田海燕(新疆兵團綠洲生態農業重點實驗室,石河子,832003;新疆農墾科學院,石河子,832003)

牛建新,王林,代永欣(石河子大學農學院園藝系,石河子,832003;新疆兵團綠洲生態農業重點實驗室,石河子,832003) 

刊 名： 生物技術通報  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分類號：   關鍵詞： 葡萄病毒B   檢測   重組質粒   序列   同源性  

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