- 相關推薦
口服利福平海藻酸鈉微球
１４８６
ＨｅｍｌｄｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＶ０１．２６Ｎｏｔ２Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２００７
口服利福平海藻酸鈉微球的制備‘
王心靜１，王巍１，黎立１，鄭越２
（解放軍總醫院第二附屬醫院１．結核病研究所；２．藥劑室，北京１０００９１）
［摘要】
目的研制口服利福平海藻酸鈉微肆。方法采甩靜電液滴法制備利福平海藻酸鈉微球，滟Ｉ定粒徑太
小、包封率、我藥量廈其影響因素，考察微球的俸外釋放特點。結果微球球形圓整，分散性好，平均粒徑７０２¨ｍ，包封率８３．５％，栽藥量１７１％，在模擬腸液中的釋放呈快慢相，時間長而藥物釋放完全。結論以海藻酸鈉、硬脂酸為材料，用靜電液滴法制備利福平微球，珠徑小、包封卓高、釋藥時間長．工藝簡便。
［關鍵詞】利福平；微球；海藻酸鈉；硬脂醴［中圖分類號］Ｒ９７８３；ＴＱ４６０
６
【文獻標識碼］Ａ
［文章編號］】∞４胛８ｌ（２００７）１２—１４８６＿０３
Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆ砌ｆａｍｐｉｃｉｎ－ＳｏｄｉｕｍＡｌ２．ｎａｔｅＭｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓｆｏｒＯｒａｌＡｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ
ｗＡＮＧｘｉｎｏｉ“ｇ。，ｗＡＮＧｗｅｉ‘，ＬＩｕ１，ｚＨＥＮＧＹｕｅ２（１．Ｄ叩酬腳ｍ０，幾ｋ阼Ｍｈ括，２．Ｄ甲ｎｎ剛ｍ。，
ｍ捫，眥拙ｆ婦，￡ｋ２蒯鋤蹦ｎ捌舶妒池ｆ礦尸Ｌ４＆聊刪舶印加ｉ，＆聽昭１０００９ｌ，礬ｉ加）
ＡＢｓＴＲＡＣＴｍｅ山０ｄ
ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ
Ｔ０
ｐｒｑ瑚℃幽ｎｐＩｃ…ｓｏｄ—日ｌ目ｎａｔｅ叫ｃ∞ｓｐｈ洲如ｒｏｒａｌ
ａｎｄｋａｄｊ“ｇ礬ｃｉｅ“ｃｙ
ｄｎ填ｆｒ啪山ｅ
ａｄｍｌｎ】ｓｔｒａｔｌｏｎ．
柚ｄ豫ｌ刪ｐｍｎＪｅ０ｆｔｈｅｍｊ啪８ｐｈ刪ｗ…ａｍｉｎｅｄ．Ｒ檔ｕｌ協Ｔｈｅ
ｄｌｓｐｅｎｉＩｙ．Ｔｈｅｍｅ鋤ｄｉａｍｅｋｒ，ｅｎｔｍＰｍ蛐ｔｅｍｃｉｅｎ。ｙ１％陀ｓｐｅｃｎｖｅｂＰＴ０ｌｏｒＷｅｄ帥ｄ
Ｃｏｎｃ●哪ｉｏｎｎｕ坩
ｃｏｍｐｌａｋ陀ｋａｓｅ０ｆ山ｅ
ｏｆｅｌｅｃｔｍ￥眥ｉｃ山ｕｐｇｅＩｍｒａⅡ０ｎ
ｗ衄ｕｓｅｄ佃ｐｍｄｕ…ｈｍｐｌｃｌｎ一８０ｄ】ｕｍｄ面ｎａｔｅｍｌｃｒｏｓｐｈ—Ｔｈ６
ｍｉ㈣ｐｈｅｒｅｓ
Ｍｅｔｌｌｏｄｓ
ｈａｄ
Ｔｈｏ
ｍｌ㈣ｐｈ㈣…Ｕ０ｆ山㈣㈣Ｐｈ盯哪ｗ唧７０
ｗａｓ
ｓｈｏｎｓｐｈｅｍ
Ｐｈｙｓｉｃｄｃｈａｍｃ＂＾ｓｄｃ９
ｓｐｈｅｎｃｄｌＹｓｈａｐｅｄａｎｄ
２
０刪
Ｔｂ￡ｍｌ㈣ｐｈｅｒｅｓｐ弛ｐ刊ｗｉ山山ｅⅢｄｈｏｄｓｈｏｗｅｄ
ｄ…Ｂｔ隅ｔｅｄ…￥ｌｍｕｈｔｅｄ
ｐｍ．８３．５％明ｄ１７．
ｉｎｔｅｓｔｉｎｄ
ｄｉａｍｍｅｒ｜ｈｌ曲ｅｎ咖ｐｍｅｍ幽ｃｌｅⅡｃｙ帥ｄ
ｌｏｎ＃ｈｇ
ｒｅｋａｓｅ
ｎｍｅ，卸ｄｔｈｅｔｅｃｈｎｄｏ胛如ｒｔ｝Ⅷｐ陀ｐ叮ａｌｌｏｎｗ鵲ｈａｎｄｖ
ＫＥＹＷＯＲＤｓ
Ｒｉｈｍｐｉｃｌ“；Ｍｌｅｍｓｐｈ㈣：Ｓｏｄｊｕｍ
ｄ４ｎ８ｆｏ；乳ｅｍｋａ￡ｉｄ
近年來，藥物緩釋日益受到重視。微球成為良好器（鄭州長城科工貿有限公司）。
１．２制備方法硬脂酸加熱熔融，與利福平二甲基距砜溶液攪拌混合，攪拌條件下加進海藻酸鈉溶液，倒人注射器，將靜電場發生器正極與注射器尖端連接，負極
的緩釋藥物載體。天然高分子材料海藻酸鈉具有良好
的穩定性和生物相容性，作為醫藥材料在人體的實際
應用。已經被藥理學實驗證明可行。海藻酸鈉與鈣離子接觸時會瞬時凝膠化，可利用此特性對多種物質進行包埋，這一制備過程簡單，避免有機溶劑．可以增加
與氯化鈣溶液連接，在注射器推動力和電場力作用下，原料液滴人低溫氯化鈣（ｃａｃｌ：）溶液，迅速固化。形成
海藻酸鈣凝膠微球，浸泡約２０ｍｉｎ后，蒸餾水清洗２
藥物穩定性，降低藥物在體內的副作用，延長藥物療效川。筆者研制了結核病治療的一線藥物——利福
平的口服海藻酸鈉微球。報道如下。ｌ材料與方法
１．１
或３次，真空避光室溫干燥１２
ｈ。
１．３微球粒徑的測定取少量干燥微球置于載玻片上，加１％吐溫８０溶液１滴，用滴管頭仔細涂布均勻，
材料與儀器利福平（ＲＦＰ）、海藻酸鈉（ＡＬ，中
小心加上蓋玻片，將其置于光學顯微鏡下檢測，分別記
錄５個視野內的粒子數目和各種粒徑大小共３００個，
等黏度）、硬脂酸（ｓＬ）、二甲亞砜均為分析純，購自
ｓｉ舯ａ公司，氯化鈣（分析純，北京化工廠），甲醇（化學
純，北京化工廠），高壓靜電液滴發生器（自制），
粒徑分布按特定范圍內的數目與總數目之比計算。
１．４包封率、載藥量的測定精確稱量一定質量的微球置于甲醇中，２５℃持續振搖加ｈ，用孔徑０４５¨ｍ
ＢｅｃｋⅢａⅡＤｕ＿８００紫外可見分光光度儀，０ｌｖｍｐｕｓＢＨ光
學顯微鏡及ｃ＿３５ＡＤ照相系統．ｓａｒｔｏｎｕｓ
ａｎａｌｙｔｌｃＡ２００ｓ
精密電子分析天平，ｓｊＱ－７型數顯直流無極調速攪拌
【收稿日期］２００７ｍ３．０８［基金項目］
金編號：０６２０５６）
微孔濾膜過濾后采用紫外分光光度法測定包封率，在
波長２５４ｎｍ處測其吸光度（＾值），按標準曲線法計算藥物含量（ｃ），標準曲線方程為Ａ＝０．０３８
０．００４
６ｃ十
【修回日期］２００７—０４－１ｌ
’解放軍總后勤部十一五課題資助項目（基
５（ｃ：峭?ｍＬ～，ｒ＝０９９４），線性范圍：２—
［作者簡介］王心靜（１９７４一），女，北京人．主治醫師，在讀博士，研究方向：結核病的治療。電話：ｏｌｏ一６６７７５９６９，Ｅ．
１８弘ｇ?ｍＬ～。
按下列公式計算包封率＝（Ｐ×ｃ）／占×１００％，載藥量＝（ｙ×ｃ）／Ｄ×１００％，ｙ為溶解介質體積，ｃ為測
ｍａｉｌ：２ｈ印Ｐｙａｎｄｐｅａｃｅ＠鯽ｈｕ．㈣ｏ
萬方數據
醫藥導報２００７年１２月第２６卷第１２期卷終
得的釋放介質濃度，單位為斗ｇ?ｍＬ～，占實驗中實際投入的利福平量，Ｄ為微球質量。
１．５體第一文庫網外釋放實驗按《中華人民共和國藥典》２０００
年版釋放度測定法中的轉籃法，溶出遞質為鹽酸（Ｈｃｌ）溶液（ｐＨ
１
２）和磷酸鹽緩沖液（ｐＨ７．４）
ｌｏｏｍＬ，恒溫攪拌，遞質溫度：（３７±０．１）℃，轉速為１００ｒ－ｍｌｎ。在一定時間點上取樣５ｍＬ，并加人
５
ｍＬ新鮮遞質，取樣用｝Ｌ徑Ｏ．４５“ｍ微孔濾膜過濾，
用紫外分光光度法測定，按標準曲線法計算微球的累積釋藥量。重復３批樣品，取平均值。２結果與討論
２
ｌ制備工藝對微球粒徑的影響微球的成球性良好，球形規整。使用靜電液滴法制備微球，各實驗條件在一定范圍內對微球粒徑影響較小。通過調整制備工藝的主要因素：電場的分布，液體流量電壓及硬脂酸、海藻酸鈉的比例等，可制得平均粒徑（７０．２±４．３）¨皿的微球。
通過控制電場的分布、液體流量、電壓等因素，可以縮小粒徑，提高粒徑的均一度。注射器銳孔至液面間距保持約３ｃｍ時，隨著液面至燒杯口距離的減少，制備的微球粒徑趨向均一。液面接近燒杯口減少了暴露的電極及燒杯四壁對電場分布的影響，一定程度上減步了子液滴的產生。而當液體流速較快或銳孔至液面間距過小時，液滴相互之間的距離較小，連續落人氯化鈣溶液后形成的微球不易分散而粘連成絮狀，不能充分的和鈣離子發生凝膠化反應。而只有當電壓大于一定值時，液體才會形成“錐一射流”的狀態，得到粒徑較小的單分散的微球，然而電壓過大，液柱形成噴射，產生更多的子液滴”’３ｏ。實驗結果提示電壓為（１．５～２．０）ｘ１０４Ｖ時效果最好。
作為阻滯劑的硬脂酸可以有效地提高緩釋性，但是靜電液滴法必須保證液滴可以在氯化鈣溶液中迅速沉降，如果硬脂酸比例過高，原料液液滴不能迅速向氯化鈣溶液中沉降，在氯化鈣溶液液面不能收縮成球體，在鈣離子作用下，隨即被固化成無定型凝膠。硬脂酸和利福平質量比ｌ：１時微球制作過程最順利，對粒徑的影響最小。
隨著海藻酸鈉的濃度增高，溶液的黏稠度亦增加，粒徑范圍增寬。實驗結果提示為獲得孔徑＜１００燦Ⅲ粒徑均一的微球，海藻酸鈉濃度不宜）２％。
２２藥物包封率的測定廈影響因素
２
２．１測定方法文獻報道測定海藻酸鈣凝膠微球
包封物的含量需要微球解聚，用磷酸鹽、檸檬酸鹽等緩沖液溶蝕微球后進行測定”’１。但是實驗中發現，海
萬
方數據?１４８７
藻酸與利福平的吸收峰相干擾。利福平易溶于甲醇。海藻酸鈣不能溶于甲醇，硬脂酸微溶于甲醇，其與甲醇的酯化反應須在一定溫度和催化劑存在的條件下才能發生”］。測定利福平和硬脂酸的甲醇溶液吸收峰，峰形和位置與利福平甲醇溶液的標準峰一致，而且微球經過甲醇浸泡振搖一定時間后再經磷酸鹽緩沖液解聚測定，測不出利福平吸收峰。因此本實驗測定方法具有良好的準確性和穩定性，而且操作簡便。
２．２．２影響因素文獻報道利福平等抗結核藥的海藻酸鈉微球和海藻酸鈉－殼聚糖微球制備方法是海藻酸鈉利福平混合物與鈣離子交聯，其包封率分別達到
７０％和８５％”’“。但是實驗中筆者發現利福平很快釋
放到鈣溶液及之后的蒸餾水清洗液中，包封率只有６４．２％，但是加人一定比例的硬脂酸后包封率顯著提
高（表１）。硬脂酸比例（僻／Ⅳ）增加，包封率提高，但
高硬脂酸比例影響微球制作和微球粒徑，故選擇利福平和硬脂酸質量比為１：１。
利福平與海藻酸鈉的比例對包封率有一定的影響，隨海藻酸鈉比例增高，一方面交聯充分，另一方面形成的微球數量增多，包封率亦提高，但增加了微球的質量，使載藥量逐漸降低。
海藻酸鈉濃度不但影響微球粒徑，對包封率亦有明顯影響。海藻酸鈉濃度＜２．５％之前包封率和載藥量逐漸增大，之后隨著海藻酸鈉濃度的增大而減小。濃度太低，不能形成微球或微球機械強度低，不能有效包埋藥物；濃度過高，黏度增大，噴制困難，微球變形，包埋效果不好。
海藻酸鈉與Ｃａ２＋的交聯時剮與微球的交聯程度密切相關，而交聯程度直接影響微球的包封率，時間過短，交聯程度不夠，不能形成“蛋箱”樣結構的致密微球，微球強度不足，包封率低。時間過長，利福平向溶液中擴散損失增加，包封率下降，而且微球顏色發生變化，提示利福平被氧化。本實驗提示２０ｍｉｎ交聯時問效果良好，與ＰＡＮＤＹ等”１報道的８～ｌＯｍｉｎ有明顯差別。見表ｌ，２。
表ｌ制備工藝對微球性狀的影響
㈣號：鬻：篇平囂桫載摯他≯
＾１１：Ｏｌ：ｌ７０Ｏ±３．５１７６“２
＾２１：１１：ｌ７３３±８７１Ｂ０７ｌ
３
Ａ３１：２ｌ：ｌ７６５±１７．２１８３７８２Ｂ１１：ｌｌ：３７０２±４３１７．１８３５Ｂ２
１：ｌ
ｌ：６
６８４±１０９
１５４
８６５
２．３藥物體外釋放性能見圖１，顯示在最優條件下制備的微球在鹽酸和磷酸鹽緩沖液的釋放情況。利福
?１４８８
平在酸性條件下的釋放比在堿性條件下慢得多，這是
海藻酸鈣對不同ｐＨ值環境反應不同的結果。在酸性
環境中，海藻酸鈣收縮，形成更緊密的網絡結構，藥物
主要通過擴散作用釋放出來，速度緩慢。在堿性環境
中，鈣離子與海藻酸交聯解離，利福平呈現更快的釋放行為。從體外釋放的結果可以看出，藥物在前４ｈ釋放速度較快，隨后呈現一個緩慢的釋放過程。由此結果推測，一些藥物可能吸附在微球的表面，或者以分子形式沉淀在微球的表面，表面藥物溶出，產生了釋放初期的突釋現象；而更多的藥物則是分散在載體骨架中，骨架材料的網狀結構和硬脂酸阻滯劑的存在限制了藥物的釋放和擴散速率，使藥物的釋放呈現緩慢和持續性的特點。因此微球中利福平的釋放是由快慢兩部分
構成，這樣既可保證短時間內有大量釋藥，也可維持有
一定量藥物持續釋放。由于海藻酸鈣微球屬于凝膠狀顆粒，具有高孔隙率的結構”ｏ，結構較疏松，在堿性溶液的溶蝕作用下．微球解聚，其中藥物釋放完全。
樣品編號囂交黑問７
表２交聯時間對包封率的影響
８＝三：包≯
ｌ２５１０ｌ：ｌ：３４２６２２５２０ｌ：ｌ：３８３５３
２５
３０
ｌ：ｌ：３
７９
３
∞加∞帥∞
０
１０
ＺＯ
３０
圖ｌ不同情況下最佳配方微球累積釋放率曲線圍一◆一ＰＨ＝ｌ２；一●—ＰＨ＝７４；一▲一ｐＨ＝７４（無ｓＬ）
由圖１可見，在有作為阻滯劑的硬脂酸存在的情
萬
方數據Ｈｅｍｌｄ０ｆＭｅｄｉｃｉｎｅＶｏＬ２６Ｎｏ．１２Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２００７
況下。利福平的釋放明顯減慢。這是由于利福平難溶于水，藥物大部分存在于硬脂酸所形成的乳滴中，當載體與溶出介質接觸時，由于脂溶性阻滯劑的存在，限制了藥物的釋放和擴散速度，因此隨著硬脂酸用量增大，藥物釋放速度也逐漸減慢。
本實驗利用靜電液滴法制備了口服利福平海藻酸鈉微球，平均粒徑７０２“ｍ，包封率８３．５％，在模擬胃液中釋放少，模擬腸液中釋放時問長、藥物釋放完全。此工藝簡便、高效．條件溫和，化學污染少，生產周期短，可以推廣至抗結核藥物的改良，將有效提高結核病患者的藥物依從性，減少復發和耐藥的產生。
［參考文獻］
［１］
ＧＯＭＢ０１Ｚ
ｗＲ，ｗＥＥｓＦ．Ｐｍ【ｅｌｎＲｅｌｅａ跎ｈＤｍＡｌ畫ｒＩ山
Ｍａｔ＾ｃｅ９［Ｊ］＾由加曙仉ｈ脅，１９９８，３１（２）：２５８—２６７
［２］薛偉明，劉袖洞，馬小軍，等．靜電液滴法制備１０ｐｍ粒徑
蛋白質藥物微球載體［Ｊ］．科學通報，２００５，５０（２２）：
２４６３—２４６８．［３］
ＶＩＫｌＤＲＡ
Ｎ，ＢｏＪＡＮＡ０，ＩＤＡＬｃ，“一Ｅｋｃｌｌ０ＢⅢｉｃ
艫…Ⅱ帥《ｄ畫ｎａｋｍｉｃｍｂｅａｄＢＩｏａｄｅｄｗｌ山ｂ弛“ＴＩｇｙ８衄ｔ
［Ｊ］№∞№‰晰，２００】，３７（１）：１７—２２
［４］
ＰＡＮＤＹＲ，ＫＨｕＬＬＬＥＲｍｉｃ瑚ｐｈ…ｔｌ?【ｕｋｍｕｌ且ｒ
ＧＫ
ｃｈｅｍｍｈｅ珥ｐｅｕ血ｐｏｋｎｔｍ
０ｆ
甜畫ｎ“ｅ－ｃｈｉｔ∞ａｎ
ｄ。Ｉｌｇ
ｃａ—ｅｍ［Ｊ］．ＪＡｍｊｎ抽ｃｋ札，２００４，５３（３）：６３５—６４０
［５］
黃可可，薛偉明，劉袖洞，等．載胰島素海藻酸鹽微球的生理條件解聚［Ｊ］．西北大學學報（自然科學版），２００６。３６
（６）：９２４—９２８．
［６］安靜，殷輝，殷蓉，等硬脂酸及其衍生物的合成路
線及新工藝［Ｊ］．河北工業科技，２００３，２０（１）：１０—１３［７］
ＡＩＮＱ，ｓＨＡＲＭＡｓ．ＫＨｕＬｕ上Ｒ
Ｇ
Ｋ“以．Ａｌｇｌｒｍｅ
ｂ黼ｅｄ
Ｐｈ刪ｋｍｅｌ】ｃ￥ａｎｄｏｍＩ
ｄｒ”ｇ
ｄｅｌｌｖ。Ｉｙ
８ｙ５ｌｅｍ
如ｒ
ｔｕｈｅＭｕｌｏｓｉ８：
ｔｈｅｍｐｅｕｔｌｃｅｄｄｅｃＨ［Ｊ］，＾肼ｈ伽
ｃ蛔ｎ，２００３，５ｌ（４）：９３ｌ一９３８．
［８］
ｓＨｕｘｚ，ｚＨｕＫ
Ｊ．ｎｅ”ｌｅ鵝ｅ
ｂｅｈａ“ｏｒ０ｆｈｉⅡｉａＩｌｌｂ【ｕｅ
如ｍ
ｃｄｃ一－ｄ目ｎｍ。ｇｅｌ
ｂｅａｄＢ∞ｍｅｄｂｙ
ｃｈｌＩｏｓ陰：ｔｈｅ
ｐ弛ｐａｒａｔｌｏｎｍｍｈｏｄｅＨ槐ｔ［Ｊ］
￡啪』Ｐ＾甜占【啦ｄｒ，２００２，
５３（１）：１９３—２０１．
【口服利福平海藻酸鈉微球】相關文章：
羧化改性海藻酸鈉沉淀吸附銅離子的研究04-28
利用甲殼胺和海藻酸鈉處理染整廢水04-29
海藻酸鈉在重金屬污染治理方面的研究04-27
殼聚糖微球作為口服疫苗載體的應用05-02
海藻酸鈉水溶液的Sol-Gel轉變與凝膠化點的決定04-28
微電解法預處理利福平制藥廢水的試驗研究04-26