虎紋鎮(zhèn)痛活性肽在畢赤酵母中的分泌表達(dá)

虎紋鎮(zhèn)痛活性肽HWAP-Ⅰ是從虎紋捕鳥蛛初毒中分離純化,具有鎮(zhèn)痛活性的多肽類神經(jīng)毒素為了在P.pastoris中高效分泌表達(dá)HWAP-Ⅰ,依照RT-PCR的結(jié)果,人工合成編碼虎紋鎮(zhèn)痛活性肽的基因片段,與酵母表達(dá)載體pPIC9K重組,構(gòu)建表達(dá)質(zhì)粒pPIC9K-HWAP-Ⅰ.轉(zhuǎn)化GS115宿主菌后,篩選出整合型His+MutS表達(dá)菌株.經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)后,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)證明HWAP-Ⅰ在畢赤酵母中能有效分泌表達(dá),產(chǎn)物的分子質(zhì)量為4 ku左右,產(chǎn)量達(dá)80 mg/L.體外小鼠輸精管阻斷實(shí)驗(yàn)證實(shí)表達(dá)產(chǎn)物具有明顯的生物活性.

作 者： 何寧佳 聶東宋 徐輝明 李敏 梁宋平   作者單位： 湖南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,長沙,410081  刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2001 28(6)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 虎紋鎮(zhèn)痛活性肽   畢赤酵母   分泌表達(dá)  

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