纖維蛋白肽與低分子量尿激酶原融合蛋白的構(gòu)建及性質(zhì)

將人工合成的寡核苷酸片段進行定向連接后,得到編碼纖維蛋白p鏈N端(p 15～42)多肽的基因片段及連接區(qū)片段(linker),再與低分子量尿激酶原(scuPA-32k)cDNA分子進一步連接后,得到了Fβ(15～42)/scuPA-32k的融合基因.在大腸桿菌中經(jīng)過IPTG誘導(dǎo)表達,經(jīng)過變性及復(fù)性,Zn2+螯合層析及SephacrylS200凝膠層析后,目的蛋白被純化.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)顯示為一條蛋白質(zhì)純化條帶,分子質(zhì)量為35 ku.經(jīng)纖維蛋白平板法測定比活為87000 U/mg.經(jīng)纖溶酶活化后的融合蛋白與低分子量尿激酶相比,對顯色底物S2444酶促動力學(xué)性質(zhì)相似.同時Fβ(15～42)/scuPA-32k具有較高的纖維蛋白的親和性并能抑制纖維蛋白凝塊的形成.

作 者： 焦建偉 劉寧 俞梅敏 茹炳根   作者單位： 北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,蛋白質(zhì)工程國家重點實驗室,北京,100871  刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2001 28(6)  分類號： Q71  關(guān)鍵詞： 低分子量單鏈尿激酶原   纖維蛋白肽   融合  

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