基因重組大腸桿菌表達截短型pZP3β的發酵條件優化

目的:對已構建好的表達pZP3β蛋白(pZP130)工程菌的培養條件進行優化,通過在5 L罐中發酵和Ni柱純化,以期獲取較大量目的產物.方法:在搖瓶中改變不同的培養及誘導條件,比較工程菌的生長和目的蛋白的表達,優化發酵條件;并在5 L發酵罐中進行發酵,獲得菌體,破碎后進行Ni柱純化.結果:優化的發酵條件是:10%的接種量,加入2%甘油的培養基培養菌體3 h后加入0.5 mmol/L IPTG,誘導4 h后收樣.在5 L發酵罐中發酵,獲得菌體量36g/L,經Ni柱純化,獲得蛋白粗制品33 mg/L發酵液.結論:截短型pZP3β蛋白可以在E coli中獲得較高表達,并且可以通過發酵和Ni柱純化得到較大量的蛋白,這有助于pZP的深入研究和應用.

作 者： 謝秋玲 陳小佳 朱偉杰 趙振云 吳建虹 徐萬祥 劉侃 李菁 Qiu-ling XIE Xiao-jia CHEN Wei-jie ZHU Zhen-yun ZHAO Jian-hong WU Wan-xiang XU Kan LIU Jing LI   作者單位： 謝秋玲,吳建虹,劉侃,Qiu-ling XIE,Jian-hong WU,Kan LIU(暨南大學生物工程研究所,廣州,510632)

陳小佳,Xiao-jia CHEN(廣東省生物工程藥物重點實驗室,廣州,510632)

朱偉杰,Wei-jie ZHU(暨南大學生殖免疫研究中心,廣州,510632)

趙振云,Zhen-yun ZHAO(暨南大學生物系,廣州,510632)

徐萬祥,Wan-xiang XU(上海市計劃生育科學研究所,上海,200032)

李菁,Jing LI(暨南大學醫學院,廣州,510632) 

刊 名： 生殖與避孕  ISTIC PKU 英文刊名： REPRODUCTION AND CONTRACEPTION  年，卷(期)： 2006 26(4)  分類號： Q819  關鍵詞： 截短型   豬卵透明帶-3β   大腸桿菌   表達   發酵  

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