SUMO-1小干擾RNA的構建及其干擾效果檢測

目的:構建小泛素相關修飾物-1(SUMO-1)基因的小干擾RNA(siRNA),并檢測其對SUMO-1基因表達的干擾效果.方法:根據SUMO-1基因序列設計一條合理的SUMO-1 siRNA,并將其克隆到pSliencer2.1-U6 neo載體中,轉化大腸桿菌DH5α,挑取陽性菌落進行酶切和測序鑒定;將構建的SUMO-1 siRNA重組質粒單獨轉染或與帶HA標簽的SUMO-1表達載體共同轉染人胚腎293T細胞,收集細胞裂解物,以抗HA和SUMO-1的抗體用Westem印跡檢測siRNA的干擾效果.結果:構建了SUMO-1 siRNA重組質粒,干擾效果可達80%以上.結論:構建的SUMO-1 siRNA為進一步進行蛋白質SUMO-1化修飾的研究奠定了基礎.

作 者： 任雯 韋瑋 葉棋濃 REN Wen WEI Wei YE Qi-Nong   作者單位： 軍事醫學科學院,生物工程研究所,北京,100850  刊 名： 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號： Q78  關鍵詞： SUMO化   SUMO-1   小干擾RNA   表達載體  

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