大豆類受體蛋白激酶基因(rlpk2)RNAi雙元表達載體的構建及其轉基因

植物類受體蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的結構在植物的生長、發育和防御等多種生理生化過程中發揮著重要的作用.利用RNA干擾技術(RNA interference RNAi)來研究RLKs的功能已日趨成熟.本文根據植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以大豆類受體蛋白激酶基因rlpk2為靶基因,在rlpk2-cDNA序列3'端選擇312bp作為構建RNAi的序列,借助中間克隆載體,經過三次亞克隆,最后形成含rlpk2-RNAi表達盒的雙元表達載體pART27-R2,并轉入農桿菌LBA4404.采用農桿菌介導大豆子葉節轉化方法,共獲得了三株轉基因植株.轉基因植株RT-PCR分析表明rlpk2基因已被成功敲減(knock-down),并且發現敲減大豆葉片中的rlpk2基因表達明顯改善大豆葉片的光合能力,結合前期研究結果,表明rlpk2基因可能在維持葉綠體的結構及保護葉綠體膜系統的完整性方面起負調節作用.

作 者： 李小平 鄧楠 馬媛媛 李鵬麗 王勇 張韌 王寧寧 LI Xiao Ping DENG Nan MA Yuan Yuan LI Peng Li WANG Yong ZHANG Ren WANG Ning Ning   作者單位： 李小平,鄧楠,馬媛媛,李鵬麗,王勇,王寧寧,LI Xiao Ping,DENG Nan,MA Yuan Yuan,LI Peng Li,WANG Yong,WANG Ning Ning(南開大學,植物生物學及生態學系,天津,300071)

張韌,ZHANG Ren(Department of Biological Sciences,University of Wollongong,NSW2522,Australia) 

刊 名： 分子細胞生物學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF MOLECULAR CELL BIOLOGY  年，卷(期)： 2006 39(1)  分類號： Q2  關鍵詞： 大豆   類受體蛋白激酶   RNAi   雙元表達載體  

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