載體介導的人支氣管上皮細胞DNA聚合酶β基因的靶向RNA干擾

目的運用載體介導的RNA干擾技術靶向抑制人DNA聚合酶β基因在支氣管上皮細胞中的表達,為研究DNA聚合酶β在環境化學污染物所致DNA損傷修復中的功能和機制作準備.方法利用分子克隆技術構建含pU6啟動子的人DNA聚合酶β基因RNA干擾特異性綠色熒光蛋白C1載體重組子"pEGFP-C1-U6-dsRNA";以脂質體法將載體重組子轉染人支氣管上皮細胞,同時以空白細胞和空載體轉染細胞作對照;在經G418篩選后,以熒光顯微成像技術觀察細胞的轉染效果,以蛋白印跡法分析轉染后細胞中的DNA聚合酶β表達情況.結果在轉染重組子的細胞中,DNA聚合酶β的表達明顯下調,僅相當于正常細胞的17.3%.結論人支氣管上皮細胞DNA聚合酶β基因的靶向抑制成功.

作 者： 胡大林 莊志雄 劉移民 何云 紀衛東 方道奎 沙焱 涂曉志 楊建平   作者單位： 中山大學公共衛生學院,廣州,510080  刊 名： 衛生研究  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH  年，卷(期)： 2006 35(2)  分類號： Q555 R994.6  關鍵詞： 重組載體   RNA干擾   DNA聚合酶β基因  

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