小鼠體外發育卵母細胞生長分化因子-9基因表達

目的 體外培養小鼠竇前卵泡得到MⅡ期卵母細胞,比較發育過程中體外與體內卵母細胞生長分化因子-9(GDF-9)的基因表達量,初步探討GDF-9的表達對卵母細胞體外發育成熟的影響.方法 出生D10雌性昆明小鼠50只,機械方法分離竇前卵泡,體外培養12 d.分別于體外培養D2、D4、D6、D8、D10、D12分離卵母細胞作為體外發育組;同窩雌性小鼠出生后D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母細胞作為體內發育組;使用半定量逆轉錄多聚酶鏈反應技術分別檢測兩組單個卵母細胞GDF-9基因表達量.應用計算機全自動圖像分析儀測量PCR產物電泳條帶的幾何平均光密度,基因表達量用相對光密度表示:檢測基因光密度/管家基因(β-actin)光密度.結果 培養第12天觀察306個卵泡,274個卵泡成活(89.5%),143個竇腔形成(51.8%);第13天觀察,155個卵母細胞成熟(56.6%).體外發育D2、D4、D6、D8、D10、D12卵母細胞GDF-9基因表達相對光密度分別是0.83±0.08、0.52±0.09、0.45±0.13、0.49±0.09、0.49±0.09、0.68±0.08;體內發育D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母細胞GDF-9基因表達相對光密度分別是0.64±0.35、0.48±0.10、0.52±0.10、0.66±0.08、0.72±0.09、0.91±0.11;體外發育D8～12卵母細胞GDF-9表達量明顯低于同期體內發育卵母細胞(P＜0.05).結論 小鼠竇前卵泡體外培養后可以生長發育,部分得到成熟的卵母細胞.小鼠卵母細胞GDF-9基因表達量隨發育時間的改變發生變化;體外發育D8～12卵母細胞GDF-9基因表達量低于同期體內發育的卵母細胞可能是其發育潛能較低的原因之一.

作 者： 彭宇洪 莊廣倫 周燦權 PENG Yu-hong ZHUANG Guang-lun ZHOU Can-quan   作者單位： 彭宇洪,PENG Yu-hong(廣州軍區武漢總醫院婦產科,湖北,武漢,430070)

莊廣倫,周燦權,ZHUANG Guang-lun,ZHOU Can-quan(中山大學附屬一院生殖中心,廣東,廣州,510080) 

刊 名： 南方醫科大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY  年，卷(期)： 2006 26(9)  分類號： Q954.43  關鍵詞： 卵母細胞   小鼠   生長分化因子9   基因表達  

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