藻膽蛋白ApcE缺失突變體的自催化重組研究

采用聚合酶鏈式反應(PCR)擴增出Anabaena.sp PCC7120別藻藍蛋白ApcE(1-240)的一系列缺失突變體基因: apcE(14-240)、apcE(25-240)、apcE(63-240)、apcE(85-240)、apcE(121-240)、apcE(133-240)、apcE(187-240),在大腸桿菌中高效表達分別獲得相對應的缺失突變體蛋白.對上述脫輔基蛋白與藻藍膽素(PCB)的體外自催化重組進行了研究.結果表明:在含有4 mol/L尿素的磷酸鉀緩沖體系中,ApcE(25-240)脫輔基蛋白可與藻藍膽素體外重組實現共價連接,獲得的色素蛋白質具有最大吸收峰(λmax＝656 nm)和熒光發射峰(λmax＝670 nm),其余6個缺失突變體蛋白僅能與藻藍膽素非共價連接,不能發生自催化重組.該結果為進一步研究連接多肽ApcE的結構和功能提供了信息,具有重要意義.

作 者： 刁紅麗 甘春暉 周明 趙開弘 DIAO Hong-li GAN Chun-hui ZHOU Ming ZHAO Kai-hong   作者單位： 刁紅麗,DIAO Hong-li(華中科技大學生命科學與技術學院,武漢,430074;武漢理工大學資源與環境工程學院,武漢,430070)

甘春暉,周明,GAN Chun-hui,ZHOU Ming(華中科技大學環境科學與工程學院,武漢,430074)

趙開弘,ZHAO Kai-hong(華中科技大學生命科學與技術學院,武漢,430074;華中科技大學環境科學與工程學院,武漢,430074) 

刊 名： 武漢理工大學學報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF WUHAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 28(10)  分類號： Q754  關鍵詞： 藻膽體   藻藍膽素   ApcE   缺失突變體   體外重組   自催化連接  

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