pfl-act基因在大腸桿菌中的高效表達及其純化

丙酮酸甲酸裂解酶是腸道細菌在厭氧代謝中十分關鍵的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.為進一步研究PFL-A的激活機理,以大腸桿菌K-12的基因組為模板,通過GenBank上公布的序列設計引物,擴增出目的基因,克隆到pMD18-T載體,經測序,所擴增出的基因與pfl-act基因具有99%的同源性.將pfl-act連接到高效表達載體pET-22b(+)中,經異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導,結果發現,pfl-act以包涵體形式表達.改變誘導劑、誘導劑量或培養溫度,對包涵體的形成均沒有明顯的影響.

作 者： 楊登峰 韋宇拓 黃志明 周興 黃日波 YANG Deng-feng WEI Yu-tuo HUANG Zhi-ming ZHOU Xing HUANG Ri-bo   作者單位： 楊登峰,黃志明,周興,YANG Deng-feng,HUANG Zhi-ming,ZHOU Xing(廣西科學院,廣西,南寧,530003)

韋宇拓,黃日波,WEI Yu-tuo,HUANG Ri-bo(廣西大學,生命科學與技術學院,廣西,南寧,530005;廣西亞熱帶生物資源保護利用重點實驗室,廣西,南寧,530005) 

刊 名： 廣西農業生物科學  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF GUANGXI AGRICULTURAL AND BIOLOGICAL SCIENCE  年，卷(期)： 2006 25(4)  分類號： Q782  關鍵詞： 丙酮酸甲酸裂解酶激活因子   包涵體   高效表達  

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