轉鐵蛋白受體單鏈抗體與BDNF融合蛋白的表達及活性鑒定

腦源性神經營養因子(BDNF)對中樞神經系統的多種神經元具有營養、修復和保護功能,但因無法通過血腦屏障限制了其應用.利用抗轉鐵蛋白受體(TfR)的單鏈抗體(ox26-scFv)作為腦轉運載體,分別擴增單鏈抗體和BDNF基因,插入pTIG-Trx載體,構建融合基因表達載體pTIG-Trx/scFv-BDNF,在大腸桿菌BL21(DE3)中實現了高效表達.經Ni-NTA金屬螯合層析柱純化后,在41kDa處可見目的純化條帶.大鼠GH3細胞免疫酶染色顯示,ScFv-BDNF融合蛋白能與轉鐵蛋白受體特異性結合,同時能夠促進雞胚背根節神經突起的生長,具備了BDNF的生物學活性.為使BDNF能夠跨越血腦屏障成為中樞神經系統的治療藥物打下了實驗基礎.

作 者： 顏冰 范明 黃培堂 YAN Bing FAN Ming HUANG Pei-tang   作者單位： 顏冰,黃培堂,YAN Bing,HUANG Pei-tang(軍事醫學科學院生物工程研究所,北京,100071)

范明,FAN Ming(軍事醫學科學院基礎醫學研究所,北京,100850) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q81  關鍵詞： 轉鐵蛋白受體   單鏈抗體   腦源性神經營養因子   血腦屏障  

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