牛干擾素單克隆抗體的制備與初步鑒定

通過(guò)IPTG誘導(dǎo)的大腸埃希菌表達(dá)重組牛干擾素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow親和層析柱進(jìn)行融合蛋白的純化,純化后的融合蛋白BovIFN-γ作為抗原免疫Balb/c小鼠,經(jīng)5次免疫后,取小鼠脾細(xì)胞與SP2/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合,間接ELISA篩選,有限稀釋法克隆亞克隆獲得分泌BovIFN-γ單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,并通過(guò)ELISA方法對(duì)其抗體效價(jià)、特異性、亞類及穩(wěn)定性進(jìn)行鑒定.獲得一株穩(wěn)定分泌BovIFN-γ單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株A12E9,細(xì)胞培養(yǎng)上清和腹水效價(jià)可達(dá)1∶3 200和1∶160 000.

作 者： 李超 林祥梅 余多慰 李全芬 李桂芬 韓雪清   作者單位： 李超,余多慰,李全芬(南京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,江蘇南京,210046)

林祥梅,李桂芬,韓雪清(中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院,北京,100029) 

刊 名： 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展  PKU 英文刊名： PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE  年，卷(期)： 2010 31(4)  分類號(hào)： S852.43  關(guān)鍵詞： 牛γ干擾素   單克隆抗體   鑒定  

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