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介導大鼠結締組織生長因子基因沉默的慢病毒載體轉移質粒的構建及鑒定

時間:2023-04-27 04:16:38 生物醫學論文 我要投稿
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介導大鼠結締組織生長因子基因沉默的慢病毒載體轉移質粒的構建及鑒定

目的:構建介導大鼠結締組織生長因子(CTGF)基因沉默的慢病毒載體轉移質粒pGCL-CTGF,為進一步包裝慢病毒載體奠定基礎.方法:以大鼠CTGF基因為靶基因,根據RNA干擾(RNAi)序列設計原則,設計4對有小發夾結構的RNAi靶點序列,退火形成雙鏈DNA,雙酶切后定向克隆到慢病毒載體轉移質粒pGCL-GFP中,構建4個含靶基因片段的重組慢病毒載體轉移質粒pGCL-CTGF,并對質粒進行PCR及測序鑒定.結果:CTGF的短發夾RNA(shRNA)片段被成功克隆到慢病毒載體轉移質粒pGCL-GFP中,4個插入序列與設計的靶基因片段完全一致.結論:構建了能夠表達4個含CTGF靶基因片段的慢病毒載體轉移質粒,為進一步包裝介導CTGF基因沉默的慢病毒載體奠定了基礎.

作 者: 彭梅娟 郝春秋 姜泓 謝玉梅 張巖 李羽 陳隆 白雪帆 PENG Mei-Juan HAO Chun-Qiu JIANG Hong XIE Yu-Mei ZHANG Yan LI Yu CHEN Long BAI Xui-Fan   作者單位: 第四軍醫大學,唐都醫院感染病診療中心,陜西,西安,710038  刊 名: 生物技術通訊  ISTIC 英文刊名: LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年,卷(期): 2008 19(3)  分類號: Q78  關鍵詞: 結締組織生長因子   慢病毒載體   轉移質粒   肝纖維化  

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