朱鹮RAPD反應(yīng)體系優(yōu)化研究

目的 研究朱鹮RAPD反應(yīng)中Mg2+濃度、復(fù)性溫度、引物濃度、Tag酶濃度和DNA模板量等幾種因素對擴(kuò)增結(jié)果的影響,并探討反應(yīng)的最優(yōu)條件.方法 以朱鹮DNA為材料進(jìn)行RAPD試驗,對Mg2+濃度、復(fù)性溫度、引物濃度、Tag酶濃度和DNA模板量進(jìn)行梯度設(shè)置,每次僅改變一個參數(shù),并保持其他條件不變.結(jié)果 建立了一套適用于朱鹮的RAPD反應(yīng)體系.結(jié)論 優(yōu)化后的朱鹮RAPD反應(yīng)條件為:反應(yīng)總體積25μL,其中含Mg2+(25 mM)2.5 μL,10×Buffer2.5 μL,dNTPs(10mM)0.5 μL,引物(8 μmol/L)1.0 μL,Tag酶(3 U/μL)0.4 μL,DNA模板(10 ng/μL)3.0 μL;PCR循環(huán)中復(fù)性溫度為37℃.

作 者： 石張燕 蒙世杰 丁長青 SHI Zhang-yan MENG Shi-jie DING Chang-qing   作者單位： 石張燕,蒙世杰,SHI Zhang-yan,MENG Shi-jie(西北大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,陜西,西安,710069)

丁長青,DING Chang-qing(中國科學(xué)院,動物研究所,北京,100080) 

刊 名： 西北大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NORTHWEST UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 36(6)  分類號： Q755  關(guān)鍵詞： RAPD   朱鹮   反應(yīng)體系  

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