油菜葉片總蛋白質雙向電泳樣品制備方法的改進

以甘藍型油菜"揚油6號"的葉片為試驗材料,分別采用傳統的TCA/Acetone(三氯乙酸/丙酮沉淀法)和改進的PEG(polyethylene glycol)分步提取法提取葉片可溶性總蛋白,并利用條件一致的蛋白質雙向電泳體系進行比較.TCA/Acetone法提取的蛋白質雙向電泳圖譜背景中由于高豐度"housekeeping"結構蛋白的存在,特別是葉片中參與光合作用的Rubisco蛋白的干擾,圖譜中低豐度調控蛋白受到了高度覆蓋和遮蔽現象,影響雙向電泳圖譜的質量.而PEG分步提取法提取的蛋白質樣品,可以剔除Rubisco蛋白,使獲得的雙向電泳圖譜清晰,無斑點間的遮蔽現象,為油菜葉片蛋白質組定量和定性分析提供了豐富的信息.

作 者： 孔芳 蔣金金 吳磊 葛才林 王幼平   作者單位： 揚州大學生物科學與技術學院,揚州,225009  刊 名： 生物技術通報  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010 ""(5)  分類號：   關鍵詞： 油菜   葉片總蛋白   雙向電泳   圖譜  

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