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細(xì)菌的鑒定
細(xì)菌的鑒定細(xì)菌的鑒定介紹：
細(xì)菌的鑒定是對(duì)細(xì)菌進(jìn)行各方面的檢查。例如：細(xì)菌對(duì)于碳水化合物的代謝試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、淀粉的水解等各種試驗(yàn)。
細(xì)菌的鑒定正常值：
胃腸道的正常菌群可分為需氧菌、兼性厭氧菌和厭氧菌。最居優(yōu)勢(shì)的是厭氧菌，占菌群總數(shù)的99%，其中僅類桿菌和雙歧桿菌就占90%，而乳桿菌和雙歧桿菌可與我們終生相隨。這些正常菌群的種類以及比例均正常。
細(xì)菌的鑒定臨床意義：
有些細(xì)菌可以分解色氨酸生成吲哚可以與二甲基氨基苯甲醛反應(yīng)生成紅色的玫瑰吲哚，因此可根據(jù)細(xì)菌能否分解色氨酸產(chǎn)生吲哚來鑒定菌種。
異常結(jié)果：1. 腸道的內(nèi)環(huán)境不處于動(dòng)態(tài)平衡，正常細(xì)菌的比例失調(diào)。 痛、胃酸、胃脹、腹瀉、腹痛、下墜、膿血便等癥狀，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)引起消化道出血、穿孔、誘發(fā)癌變，如胃癌、結(jié)腸癌等。 2. 埃希氏菌引起腸道外感染，特別是泌尿道感染。枸櫞酸桿菌屬引起原發(fā)性枸櫞酸桿菌肺炎或繼發(fā)性枸櫞酸桿菌肺炎。病理改變主要表現(xiàn)為支氣管肺炎，可有肺泡壁破壞形成小膿腫及局灶性出血。克雷伯菌屬引起的呼吸道感染 、敗血癥、化膿性腦膜炎、尿路感染等臨床癥狀。還有沙門菌屬、變形桿菌屬等引起的各種異常癥狀。3. 某些細(xì)菌水解淀粉并利用其水解產(chǎn)物，有產(chǎn)酸產(chǎn)氣導(dǎo)致人體的不適。
需要檢查的人群： 有消化道出血、穿孔、誘發(fā)癌變等各種細(xì)菌感染癥狀者。
細(xì)菌的鑒定注意事項(xiàng)：
不合宜人群： 暫時(shí)不明
檢查前禁忌：要保持良好的作息習(xí)慣，注意正常的飲食習(xí)慣。
檢查時(shí)要求：積極配合醫(yī)生
細(xì)菌的鑒定檢查過程：
一. 吲哚試驗(yàn)
方法：以接種環(huán)接種待試細(xì)菌的新鮮斜面培養(yǎng)物于鄧亨氏蛋白胨溶液中， 37℃培養(yǎng)24～48小時(shí)后(可延長(zhǎng)4～5天)。于培養(yǎng)液中加入戊醇或二甲苯2～3ml，搖勻，靜置片刻后，沿試管壁加入試劑2毫升。在戊醇或二甲苯下面的液體變紅色者為陽性反應(yīng)。
也可將一指頭大的脫脂棉，滴上兩滴歐立希氏試劑，再在同處加滴兩滴高硫酸鉀(K2S2O4)飽和水溶液，置于含培養(yǎng)液的被檢試管中，離液面約半寸，置燒杯內(nèi)水浴煮沸為止，脫脂棉上出現(xiàn)紅色為陽性。此法略繁，但省試劑且準(zhǔn)確，因?yàn)閷⒃噭┘拥揭后w中，吲哚和糞臭素均呈陽性，而用此法，只是吲哚(它能揮發(fā))呈陽性反應(yīng)。
亦可以濾紙片浸濕1%的二甲基苯丙烯甲醛的10%濃HCl溶液，然后以接種環(huán)刮取一環(huán)瓊脂的純培養(yǎng)物涂布于該濾紙上。
細(xì)菌涂印周圍呈藍(lán)色者為陽性，細(xì)菌涂印周圍無色澤變化或淡黃色者為陰性。
二. 淀粉的水解
淀粉在酸的催化作用下，能發(fā)生水解;淀粉的水解過程：先生成分子量較小的糊精(淀粉不完全水解的產(chǎn)物)，糊精繼續(xù)水解生成麥芽糖，最終水解產(chǎn)物是葡萄糖。
對(duì)劑：碘化鉀 2g 蒸餾水 300ml
培養(yǎng)基：將細(xì)菌接種在平板上，置37度溫箱中培養(yǎng)24h，加革蘭氏碘液于菌落上，觀察顏色變化，呈藍(lán)色者為陰性，無藍(lán)色為陽性。
三. β-半乳糖苷酶試驗(yàn)
試劑：0.75M ONPG溶液：取80mg溶于15ml蒸餾水中，在加入緩沖液(6.9g NaH2P04溶于45ml蒸餾水中，用30% NaOH調(diào)整pH為7.0，再加水至50ml)5ml，置4℃冰箱中保存。
方法：取純菌落用無菌生理鹽水制成濃的菌懸液，加入0.25ml ONPG液，置35℃水浴20min至3h，觀察結(jié)果。
結(jié)果判定：通常在20～30min內(nèi)顯色。出現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng)。
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